2023
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用于靶向捕獲測序的鏈霉親和素磁珠高通量測序(或新一代測序,Next Generation Sequencing, NGS)是對傳統(tǒng)Sanger測序的革命性變革,解決了一代測序一次只能測定一條序列的限制,一次運(yùn)行即可同時(shí)得到幾十萬到幾百萬條核酸序列信息,但這些測序數(shù)據(jù)分析的復(fù)雜程度大大增加了科研人員的工作量,且隨著測序深度的增加,測序成本也日益增加。基于高通量測序技術(shù)的靶向捕獲測序可以針對目標(biāo)基因組區(qū)域進(jìn)行分離、富集和測序,檢測靈敏度高且數(shù)據(jù)分析難度低,在精準(zhǔn)醫(yī)療的時(shí)代,發(fā)揮著越來越大的作用。文庫構(gòu)建是靶向捕獲測序獲得有效結(jié)果的基礎(chǔ)和關(guān)鍵,目標(biāo)區(qū)域捕獲又是影響文庫構(gòu)建質(zhì)量的關(guān)鍵。液相雜交捕獲是靶向捕獲測序中常用的目標(biāo)區(qū)域捕獲方法之一,在該技術(shù)中標(biāo)記生物素的探針與目標(biāo)區(qū)域雜交后,通過與磁珠表面包被的鏈霉親和素結(jié)合實(shí)現(xiàn)目標(biāo)區(qū)域的捕獲,隨后經(jīng)變性將探針與目標(biāo)區(qū)域分開,通過磁分離去除結(jié)合在磁珠表面的空探針后,即可完成目標(biāo)區(qū)域的捕獲。鏈霉親和素磁珠作為液相雜交捕獲的核心原料之一,其品質(zhì)的優(yōu)劣直接影響文庫構(gòu)建的質(zhì)量,進(jìn)而影響測序結(jié)果的準(zhǔn)確性。 圖1. Agilent SureSelect液相雜交捕獲流程 目前進(jìn)口磁珠如Dynabeads、JSR及Merk的鏈霉親和素磁珠仍然在靶向捕獲測序中占有較大份額,但隨著測序成本降低的需求及在國家大力發(fā)展自主核心產(chǎn)品的號召下,國內(nèi)也出現(xiàn)了...